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动植物细胞发酵罐怎么保养

 更新时间:2025-12-13    点击量:18
动植物细胞发酵罐的保养核心是清洁灭菌、部件维护、参数校准,需结合细胞培养的特殊性(无细胞壁、对剪切力敏感、易污染)开展,具体保养流程和要点如下:

一、 每次使用后:即时清洁与灭菌,避免残留污染

  1. 残液排空与初步冲洗

    • 发酵结束后,先排空罐内残液、培养基和细胞碎片,用去离子水或纯化水反复冲洗罐体内壁、搅拌桨、挡板、取样口等部位,去除肉眼可见的残留。

    • 对于动物细胞专用的气升式发酵罐(无搅拌桨,剪切力低),需重点冲洗气液分布器的微孔,防止堵塞。

  2. 化学清洗,去除顽固污渍

    • 针对蛋白质、多糖等难溶残留,配制碱性清洗剂(如 0.5%–1% NaOH 溶液),注入罐内至浸没所有接触部位,循环清洗 30–60min;若残留较多,可适当加热至 40–50℃(避免高温损伤密封件)。

    • 若有钙镁沉淀或无机物残留,先用酸性清洗剂(如 0.1%–0.5% 稀硝酸)循环清洗 20–30min,之后用大量纯化水冲洗至中性(pH 6.5–7.5),防止酸碱残留损伤细胞。

    • 注意:动植物细胞发酵罐的硅胶管、橡胶密封垫等部件,不可长时间接触强酸强碱,清洗后需及时取出单独处理。

  3. 灭菌,杜绝杂菌滋生

    • 在位灭菌(SIP):优先采用高温蒸汽灭菌,参数为 121℃、0.1MPa、20–30min,覆盖罐体、管路、阀门、传感器探头等所有与培养基接触的部件;对于不耐高温的部件(如 pH 电极、溶氧电极),需拆卸后用75% 乙醇浸泡或紫外照射灭菌。

    • 灭菌后处理:灭菌完成后,保持罐内干燥,防止冷凝水滋生杂菌;若长期不使用,可通入无菌空气吹干罐内。

二、 定期维护:核心部件的检查与更换

  1. 密封件与连接件维护

    • 发酵罐的罐盖密封圈、管路硅胶垫圈、阀门密封垫是易损件,需每月检查一次,若出现老化、变形、开裂,立即更换,防止漏气漏液和污染。

    • 动物细胞发酵罐的密封件建议选择医用级硅胶或氟橡胶,定期用医用酒精消毒,避免材质溶出物影响细胞生长。

  2. 搅拌与通气系统维护

    • 机械搅拌式发酵罐:每季度检查搅拌桨的轴承和减速电机,添加专用润滑油;检查搅拌桨与轴的连接是否松动,防止运转时产生剪切力损伤细胞。

    • 通气系统:定期拆洗空气过滤器(滤芯材质多为聚四氟乙烯或纤维素),若滤芯堵塞或灭菌次数过多,及时更换;气升式发酵罐的曝气头微孔需用超声波清洗,保证通气均匀。

  3. 传感器与仪表校准

    • pH 电极、溶氧电极:每月校准一次,pH 电极用标准缓冲液(pH 4.0、7.0、10.0)校准,溶氧电极用饱和亚硫酸钠溶液(零氧点)和空气(100% 溶氧点)校准;使用前后需用保护液浸泡,防止电极干涸失效。

    • 温度传感器、压力传感器:每季度校准一次,确保温度控制精度在 ±0.5℃内,压力显示准确。

三、 长期停用保养:防潮防锈,延长设备寿命

  1. 若发酵罐长期停用(超过 1 个月),需完成清洁 - 灭菌 - 干燥流程:

    • 罐体内壁、搅拌桨等金属部件,涂抹一层食品级防锈油,防止生锈;

    • 可拆卸部件(如电极、密封圈、过滤器)清洗灭菌后,密封存放于干燥、无尘的环境中。

  2. 断开发酵罐的电源和气源,关闭所有阀门,做好防尘罩防护;定期(每月)通电运行 10–15min,检查电机和控制系统是否正常。

四、 保养注意事项

  1. 动植物细胞发酵罐的保养需区分材质:玻璃罐体避免碰撞和温差骤变;不锈钢罐体不可用钢丝球刷洗,防止刮伤内壁滋生杂菌。

  2. 清洗和灭菌时,避免腐蚀性试剂接触传感器和电气部件;动物细胞发酵罐严禁使用含氯消毒剂,防止残留氯毒害细胞。

  3. 建立保养台账,记录每次清洁、灭菌、部件更换和校准的时间,便于追溯。


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